细胞毒性检测试剂的用途和原理

它们用于评估各种化学物质，包括药品和化妆品。

测试包括毒性测试（评估化学物质对细胞表现出毒性的浓度）和功效测试（评估化学物质对细胞表现出药理作用的浓度）。细胞

毒性试剂也可用作动物试验的替代方案。

细胞毒性检测试剂原理

测量方法有两种：“细胞增殖能力”和“细胞毒性”，直接分析细胞增殖和毒性，以及“细胞活力”，间接分析细胞数量和毒性。

“细胞活力”测定是一种被称为MTT法或WST法的方法，该方法利用还原性显色剂和活细胞中的脱氢酶活性，通过吸光度测定来计数细胞。由于其测定简便、安全、可重复性好，广泛应用于细胞增殖试验和细胞毒性试验。

“细胞毒性”测定是一种以细胞膜损伤导致细胞外漏出的酶（乳酸脱氢酶：LDH）为指标，测定细胞毒性的方法。

细胞毒性测试

细胞毒性测试有多种方法，需要使用细胞毒性测量试剂，具体取决于测试中使用的细胞的集落形成方法。以下是一些最常见的方法：

菌落形成试验

：菌落形成试验是一种将细胞直接与样品（例如医疗器械）接触，并使用提取物在培养基中形成菌落的测试方法。

直接接触试验（菌落形成法） 

直接接触试验是取医疗器械的一部分，浸没在培养基中，将细胞直接接种于其上，形成菌落进行检测的试验方法。

其他方法包括“组织培养（TC）插入试验（菌落形成法）”、“洗脱试验（亚汇合法）”和“直接接触试验（亚汇合法）”。

在这两种方法中，毒性都是由细胞形成的菌落（即由多个或多个细胞组成的细胞聚集体）中活细胞的百分比决定的。

有用于计数活细胞的“细胞活力测定试剂”和用于计数死细胞的“细胞毒性测定试剂”。

细胞活力测定试剂

细胞活力测定试剂在细胞毒性试验中，仅与形成菌落的活细胞发生反应，仅标记活细胞或提取与活细胞反应产生的物质，从而对活细胞进行计数。

一种典型的与活细胞反应并标记的系统是利用还原性显色剂和活细胞中的脱氢酶活性。通过测量吸光度来检测已标记的活细胞，并通过计数细胞数量来确定毒性。

该方法操作简便，不需要特殊设备，可以间接评价细胞增殖能力和细胞毒性，因此应用最为广泛。

但如果只统计活细胞数，则无法判断在细胞整体没有减少的情况下，活细胞数是否还存活，或者细胞整体是否减少了，而且活细胞的脱氢酶活性也可能降低。

细胞毒性测定试剂

由于单独计数活细胞可能会有缺陷，我们还使用细胞毒性测定法进行测试，该测定法利用染料来测量死细胞的数量。

这种染料具有仅对死细胞起反应的特性，使用因死细胞中细胞膜受损而从细胞中泄漏出来的酶作为指示剂。

我们使用“细胞活力测定试剂”计数活细胞，使用“细胞毒性测定试剂”计数死细胞数量，以全面评估细胞毒性。